Фотохимическая интернализация для опосредованной вирусом доставки молекулы в цитозоль

(19) RU (11) 2317827 (13) C2 (51) МПК
A61K41/00 (2006.01)
A61K48/00 (2006.01)
C12N5/10 (2006.01)
Статус: по данным на 27.03.2012 — действует
Пошлина: учтена за 11 год с 30.11.2011 по 29.11.2012
(21), (22) Заявка: 2003119155/15, 29.11.2001
(24) Дата начала отсчета срока деяния патента:
29.11.2001
(30) Конвенционный ценность:
29.11.2000 GB 0029142.7
01.12.2000 GB 0029405.8
15.06.2001 GB 0114696.8
(43) Дата публикации заявки: 20.12.2004
(56) Перечень документов, цитированных в отчете о
Поиске: WO 096/07432 A, 14.03.1996. FELGNER J. et. al. Enhanced gene delivery and mechanism studies with a novel series of cationic lipid formulations. J. of Biol Chem. 1994, v.269, N4, pp.2550-2561. COTTEN M. et. al. High efficiency receptor — mediated delivery of small and large (48 Kilobase gene constructs using the endosome-disruption activity of
(85) Дата перевода заявки PCT на национальную фазу:
30.06.2003
(86) Заявка PCT:
GB 01/05281 (29.11.2001)
(87) Публикация PCT:
WO 02/44395 (06.06.2002)
Адресок для переписки:
129010, Москва, ул. Б. Спасская, 25, стр.3, ООО «Юридическая компания Городисский и Партнеры», пат. пов. Е. Е.Назиной, рег. № 517
(72) Создатель(ы):
ХОГСЕТ Андерс (NO),
БЕРГ Кристиан (NO),
МЕЛАННСМО Гуннхильд Мари (NO),
ЭНГЕСЭТЕР Биргит Овстебе (NO),
ПРАСМИКАЙТЕ Лина (NO)
(73) Патентообладатель(и):
ПКИ БИОТЕК АС (NO)
(54) ФОТОХИМИЧЕСКАЯ ИНТЕРНАЛИЗАЦИЯ ДЛЯ ОПОСРЕДОВАННОЙ ВИРУСОМ ДОСТАВКИ МОЛЕКУЛЫ В ЦИТОЗОЛЬ
(57) Реферат:
Истинное изобретение относится к области медицины и касается фотохимической интернализации для опосредованной вирусом доставки молекулы в цитозоль клеточки. Суть изобретения включает метод введения нуклеиновой кислоты в клеточку средством контактирования обозначенной клеточки с фотосенсибилизирующим средством и с молекулой нуклеиновой кислоты, подлежащей введению, которая представляет собой часть генома вирусного носителя либо переносится в составе вирусного носителя, и облучения обозначенной клеточки светом с длиной волны, действенной для активации фотосенсибилизирующего средства. Преимущество изобретения заключается в повышении эффективности проникания нуклеиновой кислоты в клеточку. 5 н. и 27 з. п. ф-лы, 14 ил.
(56) (продолжение):
CLASS=»b560m»defective of chemically inactivated adenovirus pacticles. Proc. Nation. Acad. Sci. 1992, v.89, N13, pp.6094-6098.
Текст описания приведен в факсимильном виде.
Формула изобретения
1. Метод введения молекулы нуклеиновой кислоты в клеточку, где обозначенный метод включает контактирование обозначенной клеточки с фотосенсибилизирующим средством, контактирование обозначенной клеточки с молекулой нуклеиновой кислоты, подлежащей введению (переносимой молекулой), которая представляет собой часть генома вирусного носителя либо переносится в составе вирусного носителя, и облучение обозначенной клеточки светом с длиной волны, действенной для активации фотосенсибилизирующего средства.
2. Метод по п.1, где обозначенная клеточка является клеточкой млекопитающего.
3. Метод по п.1 либо 2, где обозначенная переносимая молекула включает ген полной длины, либо кДНК, либо другую ДНК, кодирующие одно и то же, либо их многофункциональный кусок.
4. Метод по п.3, где обозначенная молекула нуклеиновой кислоты кодирует пролекарство, активирующее фермент, белковый токсин, белок, индуцирующий апоптоз, иммуностимулирующий фактор, опухолеспецифичный антиген, ингибитор иммунитета/воспаления, ингибитор ангиогенеза, белок, индуцирующий образование сосудов, белок инициации коагуляции, внутриклеточное антитело либо рекомбинантный иммунотоксин.
5. Метод по п.1 либо 2, где обозначенная переносимая молекула кодирует антисмысловую молекулу РНК, рибозим, аптамер, олигонуклеотид либо триплексобразующий олигонуклеотид.
6. Метод по хоть какому из пп.3-5, где обозначенная переносимая молекула включает от 20 до 10000 оснований в длину.
7. Метод по хоть какому из пп.1-6, где обозначенная переносимая молекула включена в вирусную конструкцию, которая содержит приобретенные из вируса элементы, нужные для того, чтоб обозначенная конструкция могла упаковаться снутри вирусного носителя.
8. Метод по хоть какому из пп.1-7, где обозначенный вирусный носитель представляет собой аденовирус, аденоассоциированный вирус, ретровирус, лентивирус, вирус герпеса, бактериофаг, вирус гриппа, вирус Сендаи, вирус осповакцины либо бакуловирус.
9. Метод по хоть какому из пп.1-8, где обозначенный вирусный носитель представляет собой аденовирус.
10. Метод по хоть какому из пп.1-9, где обозначенное фотосенсибилизирующее средство локализовано во внутриклеточных компартментах, в особенности в эндосомах либо лизосомах.
11. Метод по хоть какому из пп.1-10, где обозначенное фотосенсибилизирующее средство отделено от вирусного носителя и желательно фотосенсибилизирующее средство и вирусный носитель контактируют с обозначенной клеточкой поочередно.
12. Метод по хоть какому из пп.1-11, где обозначенное фотосенсибилизирующее средство выбирают из группы, состоящей из TPPS 2a, A1PcS2a, и других амфифильных фотосенсибилизаторов.
13. Метод по хоть какому из пп.1-11, где обозначенные фотосенсибилизирующие средства относятся к соединениям, представляющим из себя 5-аминолевулиновую кислоту либо сложные эфиры 5-аминолевулиновой кислоты либо их фармацевтически применимым солям.
14. Метод по хоть какому из пп.1-13, где обозначенный вирусный носитель контактирует с обозначенной клеточкой в течение 15 мин — 6 ч.
15. Метод по хоть какому из пп.1-14, где обозначенное фотосенсибилизирующее средство контактирует с обозначенными клеточками за 4-24 ч до облучения.
16. Метод по хоть какому из пп.1-15, где обозначенная стадия облучения составляет от 1 до 10 мин.
17. Метод по хоть какому из пп.1-16, где обозначенный вирусный носитель добавляют до либо после облучения.
18. Метод по хоть какому из пп.1-17, где одно либо оба обозначенных: фотосенсибилизирующее средство и переносимая молекула присоединяются, ассоциируются либо конъюгируют с одной либо более молекулами носителя, мотивированными молекулами либо векторами.
19. Метод по хоть какому из п.18, где обозначенный вирусный носитель присоединяется, ассоциируется либо конъюгирует с молекулой носителя.
20. Метод по п.18 либо 19, где обозначенная молекула носителя включает поликатион либо катионный липид.
21. Метод по п.20, где обозначенный поликатион представляет собой поли-L-лизин либо поли-D-лизин либо Superfect®.
22. Метод по п.20, где обозначенный катионный липид представляет собой ДОТАП.
23. Метод по п.19 либо 20, где обозначенная молекула носителя представляет собой липосому либо конструкцию на базе липида, желательно содержащую само мало один катионный липид.
24. Метод по хоть какому из пп.1-23, где по наименьшей мере 50% из обозначенных клеток, вовнутрь которых вводят обозначенную молекулу, сохраняют жизнеспособность.
25. Метод по хоть какому из пп.1-24, где по обозначенный метод производят на клеточках in vitro либо in vivo.
26. Метод исцеления либо профилактики заболевания, расстройства либо инфекции у пациента способом генной терапии, включающей введение переносимой молекулы нуклеиновой кислоты, которая представляет собой часть генома вирусного носителя либо переносится в составе вирусного носителя, вовнутрь одной либо большего числа клеток in vitro, in vivo либо ex vivo в согласовании с реальным методом по хоть какому из пп.1-25, когда есть необходимость введения обозначенных клеток пациенту.
27. Метод по п.26, где обозначенная генная терапия получается из-за мотивированного ликвидирования специфичных клеток, мотивированного ингибирования генной экспрессии, аугментационной терапии либо корректировки мутации за счет введения гена либо его части, способных к экспрессии многофункционального продукта, компенсирующего имеющийся у пациента недочет.
28. Метод по п.26 либо 27, где обозначенные болезнь, расстройство либо зараза представляют собой рак, ревматоидный артрит, склероз, вирусную либо другую заразу, псориаз, солнечный кератоз, рану, перелом, боровки либо наследное генетическое нарушение.
29. Метод по хоть какому из пп.26-28, где вводят in vivo от 10 3 до 1015 вирусных частиц.
30. Клеточка, содержащая переносимую молекулу нуклеиновой кислоты, которая представляет собой часть генома вирусного носителя либо переносится в составе вирусного носителя, приобретенная согласно методу по хоть какому из пп.1-25.
31. Лекарственная композиция для генной терапии, включающая переносимую молекулу нуклеиновой кислоты, которая представляет собой часть генома вирусного носителя либо переносится в составе вирусного носителя, и фотосенсибилизирующее средство либо клеточку по п.30.
32. Применение переносимой молекулы нуклеиновой кислоты, которая представляет собой часть генома вирусного носителя либо переносится в составе вирусного носителя, и фотосенсибилизирующего средства, как определено в любом из пп.1-25, либо клеточки по п.30 для получения фармацевтического средства для внедрения в генной терапии.
Ценность по пт:
29.11.2000 — пп.1, 2, 4-7, 9-12, 15-20, 24-28, 30-32;
01.12.2000 — п.13;
15.06.2001 — п.14;
29.11.2001 — пп.3, 8, 21-23, 29.
Картинки

Советуем ознакомиться и с не так давно аарегистрированным патентом 2464851.

Missha_rus — Стволовые клеточки растений в косметологии


Сейчас я расскажу про внедрение стволовых клеток растений в косметологии. Сходу оговорюсь, растительные стволовые клеточки нередко ассоциируются с эмбриональными стволовыми клеточками. Внедрение последних вызывают целый ряд подозрений, а время от времени и брутальную реакцию из-за недоказанной эффективности и не выявленных побочных действий, как у обыденных обывателей, так и у профессионалов.
Но это 2 полностью различных «продукта», они имеют различное происхождение и назначение. Эмбриональные стволовые клеточки получают в лабораторных критериях во время искусственного осеменения. Этот вид клеток употребляется в медицине для исцеления суровых болезней либо восстановления пораженных органов.
В отличие от эмбриональных стволовых клеток — стволовые клеточки растений употребляют в косметологии для глубочайшего омоложения кожи. И на сегодня применение средств, содержащих стволовые клеточки растений, является испытанным и очень действенным методом сохранить юность кожи на долгие и длительные годы.
Как действуют растительные стволовые клеточки на кожу: «Каждая взрослая стволовая клеточка может без помощи других генерировать новое растения. Поначалу из начального растения получают жизнестойкую ткань, потом в ней делается маленький разрез. Скоро на его месте формируется тусклая масса клеток, которая именуется каллюс. Медлительно делящиеся клеточки каллюса недифференцированны: им недостает параметров обычных растительных клеток. Эта разработка позволила представить, что растительные клеточки можно использовать и для устранения заморочек старения кожи человека» (материал взят с krasota. kak-ya. ru›by/retgold/3610).
После проведения ряда лабораторных исследовательских работ было установлено, что растительные стволовые клеточки яблока защищают стволовые клеточки кожи и поддерживают их способность к обновлению, предупреждают возникновение новых признаков старения, также уменьшают глубину морщин в среднем на 15%.
Южноамериканскими и европейскими учеными было подтверждено, что внедрение экстракта растительных стволовых клеток помогает приостановить процесс старения: улучшает клеточный метаболизм, очищает клеточки от токсинов, восстанавливает их покоробленные составляющие, обеспечивает адекватную реакцию на стрессовые ситуации.
Таким макаром, на сегодня растительные стволовые клеточки — это самая многообещающая разработка в области косметологии, сначала для антивозрастной косметики для кожи лица.
Внедрение новейших способов, строго контролируемых критерий, современных познаний на базе долгих исследовательских работ и испытаний позволили корейской компании Missha создать и выпустить свою серию по уходу за увядающей кожей с применением стволовых клеток морских растений.
Серия «Super Aqua Marine Stem Cell» состоит из 4 средств (подтягивающие гель-тоник, сыворотка, смесь и крем), обогащенные уникальными сверхтехнологичными ингредиентами, которые избавляют возрастные конфигурации, также увлажняют и защищают кожу от раннего старения.
В состав каждого средства входят 3 активных компонента стволовых клеток морских растений.
— экстракт стволовых клеток красноватого мангрового дерева, которое успокаивает кожу и защищает ее от вредного воздействия среды;
— экстракт стволовых клеток водных растений хидзики богат неорганическими солями, такими, как кальций и йод;
— экстракт стволовых клеток водных растений хетоморфы делает кожу гладкой и здоровой, повышая упругость и упругость.
последовательность использования средств marine stem cell
Линия создана для дам в возрасте 25-35 лет.
Все средства их серии «Super Aqua Marine Stem Cell» Вы сможете заказать на веб-сайте официального дистрибьютора корейской косметики Missha www. missha-shop. ru либо приобрести в розничных магазинах по адресам: г. Санкт-Петербург, Столичный пр-т, д.2/6, г. Москва, Шлюзовая набережная, д. 8, кабинет 104.

Осмос

Раствор
Конц. р-ра, %
Кристаллы
K4[Fe(CN)6]
3-5
CdCI2, ZnCI2, MnCI2, FeCl2, CoCI2, NiCI2, FeCl3
K3[Fe(CN)6]
3-5
ZnCl2, FeCl2
CdCl2, CuSO4
3-5
K3[Fe(CN)6]
CuSO4
10-15
K3[Fe(CN)6]
Pb(NO3)2, NiCl2
3-5
K3[Fe(CN)6]
K2CrO4
3-5
BaCl2
Na2B4O7
3-5
AlCl3, Pb(NO3)2
Na2CO3
3-5
BaCl2, CaCl2
Na2CO3
5-20
Sr(NO3)2, Ba(NO3)2,
Na2CO3
10-20
KI, Bal2, Cal2
Pb(NO3)2
11
KI, Cal2
Pb(CH3COO)2
20
Pb(NO3)2
CdI2
Насыщенный
Pb(CH3COO)2
NaI
10
Pb(NO3)2
Na3PO4
2-4
MgCl2
Na3PO4
7-15
CoCl2, ZnCl2, Ba(NO3)2,Sr(NO3)2 ,Pb(NO3)2
Pb(NO3)2
5-10
Na3PO4
Pb(NO3)
10-15
K2CrO4
Pb(NO3)
20
(NH4)2Cr2O7
Na2CrO4
5-20
Pb(CH3COO)2
Pb(CH3COO)2
10-20
K2CrO4, K2Cr2O7
K2HPO4
3-4
CdCl2, BaCl2, ZnCl2, FeCl2, MnCl2, CaCl2
K2Cr2O7
3-20
Pb(CH3COO)2, Pb(NO3)2
NaOH
25
CoCl2
Na2CrO4
4
MnCl2, Cd(NO3)2,Sr(NO3)2, BaCl2

БОТАНИКА — РАСТИТЕЛЬНАЯ Клеточка

Posted in Ботаника — Серебряков МОРФОЛОГИЯ И АНАТОМИЯ РАСТЕНИЙ
Глава I.
РАСТИТЕЛЬНАЯ Клеточка
ОБЩЕЕ ПОНЯТИЕ О Клеточке
Строение и обилие растительных клеток. В растительной клеточке, обычно, можно различить три главные части: более либо наименее жесткую и крепкую углеводную оболочку, одевающую клеточку снаружи; протопласт (греч. Протос — 1-ый; Пластос — оформленный) — живое содержимое клеточки,- прижатый в виде обычно достаточно узкого постенного слоя к оболочке, и, в конце концов, вакуоль (лат. vacuus — пустой) — место в центральной части клеточки, заполненное в обычном случае жидким содержимым — клеточным соком.
Клеточная оболочка и вакуоль являются продуктами жизнедеятельности протопласта и образуются им на определенных шагах развития клеточки. Как в протопласте, так и в клеточном соке (изредка в оболочке) могут встречаться разные оформленные частички — включения (кристаллы, крахмальные зерна, капли масла и др.). Протопласт представляет собой очень сложное образование, дифференцированное на разные составляющие, именуемые органеллами (либо органоидами), которые повсевременно в нем встречаются, имеют свойственное строение, позволяющее просто отличать их друг от друга, и делают специальные функции (рис. 10, 11). К органеллам клеточки относятся ядро, пластиды, митохондрии, рибосомы, эндоплазматический ретикулум, диктиосомы, пероксисомы (микротельца), лизосомы. Органеллы погружены в гиалоплазму, которая обеспечивает их взаимодействие. Гиалоплазма с органеллами, за вычетом ядра, составляет цитоплазму клеточки (ранее ее нередко называли просто плазмой). Количественное соотношение и особенности строения органелл определяют специфическую направленность жизнедеятельности той либо другой спец клеточки.
Органеллы в клеточках разных растений и животных имеют схожую молекулярную компанию и близки по хим составу, что обосновано сходством выполняемых ими функций. В этом проявляется общность главных процессов жизнедеятельности у растений и животных. Но меж ними имеются и значительные различия. Так, своеобразие растительных клеток заключается в наличии у их крепких оболочек, пронизанных плазмодесмами, пластиди почти всегда большой центральной вакуоли. Эти особенности, присущие только растительным клеточкам, обоснованы прикрепленным образом жизни, отсутствием скелета, автотрофностью и отсутствием либо слабеньким развитием у растений системы выделения отбросов. Соответствующая особенность растительных клеток, связан-

Материалы за Декабрь 2012 года

Боюсь, что уже дождались. По последней мере, искусственную жизнь — так точно дождались, и даже более того. Как Вам экспансия жизни со скоростью 6 планет в час — впечатляет? Желаете выяснить больше — читайте далее.
Но до этого позволю для себя (и вам рекомендую) маленькую фантазию на тему того, что бы мы (население земли) отдали приказ бы делать безупречному исполнителю (такой джин из бутылки либо золотая рыбка планетарного

Искусственная клеточка сотворена южноамериканскими учеными

искусственная клеточка сотворена южноамериканскими ученымиГруппа американских ученых под управлением биолога Крейга Вентера достигнула ошеломляющих результатов. Им удалось в первый раз в истории науки синтезировать искусственный геном бактерии Mycoplasma mycoides, пересадить его в бактерию и получить, как говорят исследователи, всеполноценную синтетическую клеточку. Вентер — основатель института генных исследовательских работ — считает, что по прошествии совершенно недолгого времени люди научатся проектировать и строить новые бактерии, которые будут делать полезные для человека функции.
искусственная клеточка сотворена южноамериканскими учеными«Нам необходимы новые инструменты в науке; и в этом плане биология предоставляет возможность обеспечить население земли новыми источниками горючего, продовольствия и новыми вакцинами. Ее способности фактически беспредельны. Мы просто недостаточно умеем их использовать. Будущее современной наук, как мне кажется, за биологией», — приводит Science слова Вентера.
Экологи, правозащитники, культурологи и целый ряд других ученых уже выступили с заявлениями, потребовав введения моратория на исследования Вентера, отметив, что в современном мире нет средств для регуляции процессов, которые безизбежно повлечет за собой открытие ученого уже окрещенное «открытым ящиком Пандоры».
Объявление Вентера и его намерение открыто опубликовать все результаты исследования (Институт обратился за разрешением к регулятору) могут быть применены в ущерб населению земли, считают некие ученые, так как разработка позволяет синтезировать и патогенные, другими словами небезопасные для жизни, бактерии.
По инфы mignews. ru

Различия клеток животных и растений. Мазки-отпечатки и соскобы

Клеточки растений отличаются от клеток животных и человека тем, что имеют твердую целлюлозную оболочку либо стеку. Под микроскопом границы растительных клеток представляются четкими, двухконтурными. Оболочка присваивает клеточкам постоянную форму (нередко схожую). Клеточки животных не имеют таковой оболочки и поболее полиморфны. Двухконтурность и относительное однообразие форм растительных клеток сохраняются в наночастицах растительной еды, изделий и т. п.
Другой отличительной особенностью растительных Клеток является наличие в цитоплазме пластид. Понятно три типа пластид: лейкопласты (тусклые), хлоропласта (зеленоватые) и хромопласты (желтоватые и красноватые). Они являются образователями запасных веществ (крахмальные зерна, алейроновые белковые зерна и др.), которые откладываются в большенном количестве в клеточках клубней, корней, луковиц, семян, в древесной породе и сердцевине деревьев и т. д. Зерна имеют вид телец, достаточно специфичных для каждого вида растений, и отлично различимы под микроскопом.
Если в итоге исследования Установлено, что частичка может являться тканью человека либо животного, то нужно найти ее видовую принадлежность. После того как установлено происхождение частички от человека, цитологическое исследование продолжают для решения вопроса о ее тканевой принадлежности.
Изготовление препаратов. Зависимо от величины и состояния объекта можно использовать один либо несколько из предлагаемых методов изготовления препаратов: мазки-отпечатки, соскобы, давленые препараты, гистологические срезы.
клеточки животных и растений
Мазки-отпечатки. Это более удачный метод изготовления препаратов при исследовании паренхиматозных органов. Обезжиренные предметные стекла прикладывают без нажима к свежайшему разрезу органа, а потом поднимают стекло, держа его строго перпендикулярно к поверхности разреза. С 1-го и такого же участка можно сделать несколько отпечатков, при всем этом в повторных будет меньше покоробленных клеток, а количество клеток органа возрастет. Мазки высушивают в термостате либо при комнатной температуре.
Соскобы. При исследовании трубчатых органов (желудочно-кишечный тракт, протоки, горло, трахея и т. п.) более отлично готовить не отпечатки, а соскобы с выстилающего эпителия. Лезвием скальпеля проводят по внутренней выстилке органа. Соскоб переносят в каплю 30% спирта на предметном стекле, в какой клеточные элементы распределяются более либо наименее умеренно. Тканевые частички размельчают при помощи препаровальных игл, посторонние примеси убирают. Препараты высушивают.
Давленые препараты. В случаях, когда объект представляет собой высохшую ткань либо ткань, из которой нереально приготовить препараты 2-мя первыми методами (мышечная, хрящевая, косгная), целенаправлено сделать давленые препараты. При всем этом нужно иметь набор инструментов, представленных на рис. 141. При помощи ножниц либо скальпеля из различных участков объекта вырезают частички шириной менее 1 мм и помещают в пробирки с 10—25% веществом уксусной кислоты.
Мягенькие ткани выдерживают в кислоте до набухания и просветления (4—24 ч), твердые (хрящ, кость) — до полной декальцинации (1—4 сут). Размягченную ткань в маленьком количестве воды переносят на предметное стекло, помещенное под стереомикроскопом, и размельчают, следя за объектом при увеличении 12,5—25. Измельчение, расщепление частиц тканей создают обычно препаровальными иглами, кончики которых должны быть отлично заточены. Очень комфортны для препаровки всех тканей игольные гребешки (Ромейс Б., 1953). Фильтровальной бумагой убирают жидкость, немного наклонив стекло.
Потом размельченные частички раздавливают меж 2-мя Предметными стеклами до получения узкой пленки и, не разъединяя стекол, оставляют их в каком-либо зажиме. После высыхания тканевой пленки (6—24 ч при комнатной температуре) стекла разъединяют при помощи скальпеля. Выходит два тонких продукта, в каких большая часть клеток размещается в один — два слоя.
— Читать дальше «Гистологические срезы. Техника выполнения гистологических срезов»
Оглавление темы «Способы оценки принадлежности клеток»:
1. Анализ частоты Y-хроматина крови и слюны. Доказательство мужского пола по крови и слюне
2. Цитологическое исследование частей тела. Содержание полового хроматина со временем
3. Задачки цитологического исследования. Установление природы частиц
4. Различия клеток животных и растений. Мазки-отпечатки и соскобы
5. Гистологические срезы. Техника выполнения гистологических срезов
6. Диагностика половой принадлежности тканей. Оценка результатов исследования тканей
7. Региональная принадлежность тканей. Установление принадлежности эпителиальных клеток
8. Следообразующие характеристики эпителия. Цитологические особенности клеток тканей
9. Изготовление мазков-отпечатков. Микроскопия мазков-отпечатков
10. Следы крови и смешанные пятна на одежке. Определение наличия вагинальных клеток
11. Применение гистологического исследования. Цели и задачки цитологического исследования